Jess全自動ウェスタンブロットシステム
Jessシステムによるパワフルなマルチプレックスウェスタン分析
Simple Westernテクノロジーを搭載したJess™システムは、化学発光検出と2色（近赤外線および赤外線）蛍光検出を統合した、高速かつ高感度なマルチプレックスウェスタン分析を実現します。Jess™は、1回のランで最大25本のキャピラリーを用いたタンパク質サイズ分離と免疫検出を自動化し、わずか3時間で完全な分析結果を提供します。これにより、従来のウェスタンブロットにおけるばらつきや手間のかかる工程を排除します。
自動化、高感度、そして堅牢なマルチプレックス機能を組み合わせることで、Jess™はウェスタンブロット分析を革新し、この重要なワークフローを21世紀へと導きます。
Jessを用いたSimple Westernの仕組み
Jessは、従来のウェスタンブロッティングにおけるタンパク質分離からイムノアッセイ検出までの工程を完全自動化し、手間がかかり、エラーや操作ミスが生じやすいステップを不要にします。サンプルと試薬を専用マイクロプレートにセットするだけで、タンパク質のサイズ別分離、抗体の添加、インキュベーション、洗浄、さらには検出に至るまでの一連の工程を自動かつ高精度に行います。わずか3時間で完全な解析データが得られます。化学発光と業界最高クラスの蛍光検出機能を備えたJessは、分子量情報を備えたピコグラムレベルの高感度検出、総タンパク質ノーマライゼーション、そして、ELISAに匹敵する高い再現性を実現します。ProteinSimpleのJess全自動ウェスタンブロットシステムは、ウェスタンブロットとELISAを一体化した次世代の解析プラットフォームです。
CatSci社によるJessの開封動画
CatSci社のバイオサイエンスチームリーダー、ライアン・モルドゥーがJessを開封し、セットアップする様子をご覧ください。この動画では、Jessを実際の研究環境にいかに簡単に統合できるかをご紹介します。
専門家の声：基礎研究から臨床応用へ
ジェスが、EV関連タンパク質の検出と定量に必要な高感度を提供することで、ソニ博士の研究をどのように変革したのかをご覧ください。
Jessはどのようにあなたのお役に立てますか？
迅速かつ安定した信頼性の高い結果
Jessを使えば、ピペット操作、実行、完了！サンプル、抗体、試薬をプレートにロードするだけで、タンパク質分離、免疫プローブ、検出、データ解析など、あらゆるアッセイステップが完全に密閉されたキャピラリー環境内で自動化されます。わずか30分の実験準備と約3時間のハンズフリー実行時間で、Jessはアッセイ内変動係数（CV）15%未満を実現し、データに自信を持つために必要な一貫性を提供します。
強力なマルチプレックスオプション
Jessは、同一サンプル上で化学発光アッセイと蛍光アッセイのマルチプレックス化をサポートしており、1回の測定で複数の標的、アイソフォーム、サイズ、および総タンパク質を同時に評価できます。
図、右：Jess を使用した総タンパク質正規化による総 AKT および pAKT の多重分析。（A）未処理（-）またはカリキュリン A で処理（+）した Jurkat 細胞の溶解液を、それぞれ 0.25 mg/mL および 0.15 mg/mL の最終濃度で分析した。各溶解液について、IR で総 AKT（緑色のバンド）、NIR で pAKT（赤色のバンド）をプローブした。（B）総タンパク質アッセイは、パネル A に示したレーンと同じレーンで実施した。
低存在量タンパク質と高存在量タンパク質を確実に検出
わずか3 µLのサンプルで、Jessは化学発光検出または二色（近赤外／赤外）蛍光検出により、ピコグラムレベルの感度を実現します。同一サンプル中に存在する高存在量タンパク質と低存在量タンパク質を、たとえ分子量が同じであっても検出することが可能です。
RePlexで、あらゆるサンプルからより多くのデータを取得
RePlexアッセイは、同一キャピラリー内で2つの連続免疫測定法（IA）またはIAと総タンパク質測定法（TPA）を同時に行うことを可能にし、各サンプルロードからのデータ出力を最大化し、追加のサンプル消費なしに、より深い生物学的知見を提供します。
RePlex機能により、Jessは柔軟なマルチプレックスオプションを提供し、同一キャピラリー内で複数のターゲット検出とタンパク質ノーマライゼーションを実行できます。
図、右：同一キャピラリー内でAKTおよび下流標的の同時リン酸化をRePlexで検出。（A）コントロール（Ctl）およびLY294002処理（LY）JurkatライセートにおけるAKT、GSK3b、cRafのリン酸化のレーンビュー。（B）RePlexにより、同一サンプルの連続プローブでウサギ由来一次抗体を用いてリン酸化されたAKTおよびGSK3bを検出したように、プローブ1とプローブ2で同じ二次抗体を使用でき、キャリーオーバーシグナルは発生しない。（C）定量分析により、LY294002処理JurkatライセートではGSK3bおよびcRafのリン酸化が減少していることが示された。エラーバーは平均値の標準偏差を表す。
完全定量分析を実現
Jessを使えば、タンパク質定量は簡単です。分析終了後、レーンビューオプションでバンドの強度を比較したり、詳細な分析でタンパク質のサイズと濃度を完全に定量的に評価したりできます。数回クリックするだけで、免疫測定法のような標準曲線を作成し、タンパク質を正確に定量できます。
RePlexを用いた総タンパク質によるノーマライゼーション
総タンパク質によるノーマライゼーションは、総タンパク質負荷量の差を補正し、ハウスキーピングタンパク質に見られる変動を回避することで、タンパク質発現量をより正確かつ確実に定量化する手法です。JessはRePlexを用いて、化学発光検出と近赤外線検出の両方による総タンパク質ノーマライゼーションを提供し、幅広いターゲットに対して柔軟かつ一貫性のある分析を可能にします。キャピラリー内での同時検出により、ブロット染色や洗浄ステップを必要とせず、非常に一貫性のある信頼性の高い結果が得られます。これにより、ノーマライゼーションが現代化され、あらゆるデータセットに対する信頼性が強化されます。
図右：hIGF1処理および未処理のMCF7ライセートにおけるAKTリン酸化の自動免疫測定法および単一キャピラリーでの全タンパク質検出。（A）リン酸化AKT（リン酸化AKT）アイソフォームおよびpan AKTは、それぞれ化学発光および近赤外蛍光を用いてプローブ1で検出され、全タンパク質シグナルはプローブ2で検出された。（B）パネルAのサンプルにおけるリン酸化AKTおよびpan AKT（上）と全タンパク質シグナル（下）のグラフ例
従来型ウェスタンブロット膜に対応した柔軟なイメージング機能
Jessは、従来型ウェスタンブロット膜のイメージングをサポートする統合イメージングシステムを搭載しており、完全自動化されたキャピラリーベースのウェスタンブロット解析と従来型ブロットイメージングの両方を1台の装置で必要とする研究室に、さらなる柔軟性を提供します。
Jessイメージングシステムは、従来のウェスタンブロッティング膜のイメージングを可能にする。
Jessを自動液体ハンドラーと連携させましょう
Jessを自動液体ハンドラーと連携させることで、サンプル、試薬、抗体、洗浄バッファーの調製とロード、および自動タンパク質分析用の複数プレートのセットアップが可能になります。
Jessと連携させる方法はこちらをご覧ください：
Jess認定サービスプロバイダープログラム（CSP）
Jessでサンプルを分析するエキスパートを見つける
当社のCSPプログラムは、JessをはじめとするBio-Techneの機器ポートフォリオと専門的な知見を活かし、効率的かつ信頼性の高いサンプル分析を実現する堅牢なソリューションを提供します。下記のサービスプロバイダーは、Bio-TechneのCSPトレーニングプログラムを修了し、Bio-Techneの機器を用いたサンプル分析を実施するための認定を受けています。
仕様
| 内容 | 総タンパク質 | 化学発光 | 蛍光 | タンパク質ノーマライゼーション |
|---|---|---|---|---|
| 必要サンプル量 | 0.3-1.2 µg | 0.6-1.2 µg | 2-4 µg | 0.6-4 µg |
| 必要サンプル容量 | 3 µL/well | |||
| サイズ(分子量)範囲 | 分子量 (MW) ラダーレンジ： 2-440 kDa | |||
| CV(サイズ) | <10% | |||
| CV(測定内) | <15% | <20% | ||
| CV(測定間) | <20% | 適用外 | ||
| 解像度 (± ％ 分子量により異なる) | ± 15-20% for MW <20 kDA ± 10% for MW >20 kDa | |||
| 定量性CV | <20% (総タンパク質アッセイおよび化学発光・蛍光検出) | 適用外 | ||
| ダイナミックレンジ | 2-3 logs | 3-4 logs | 4 logs | 2-3 logs |
| 感度 | ng | Low pg | Low pg | ng |
| キャピラリーサイズ | 5 cm, 100 µm, 400 nL | |||
| 測定時間 | <3 時間 | イムノアッセイ込みで <4 時間 | ||
| 最大サンプル数／測定 | 13または25 | |||
| 重量 | 23 kg | |||
| 機器サイズ (ドア閉時) | 高さ 0.36 m × 幅 0.30 m × 奥行 0.57 m | |||
| 機器サイズ (ドア開時) | 高さ 0.36 m × 幅 0.53 m × 奥行 0.57 m | |||
| 電源 | 米国／カナダ：120 V AC、60 Hz、4.2 A 欧州：240 V AC、50 Hz、2.1 A 日本：100 V AC、50/60 Hz、5.0 A | |||
| 測定時の温度レンジ | 18-24 °C | |||
| 測定時の湿度レンジ | 相対湿度20-60%、結露しないこと | |||
+ 必要なサンプル量は3 µL/ウェルです。
Jessトレーニングキットのセットアップ方法
このステップバイステップのビデオをご覧いただくと、Jessトレーニングキットのセットアップ方法と操作方法を詳しく解説しています。
ウェビナー
従来のウエスタンブロット法の限界を超えて：モデル系における低存在量タンパク質の検出
ブロットを超えて：再現性のある、論文発表に適したタンパク質発現データを得る
iPSC由来ミクログリアにおける細胞シグナル伝達経路の解析によるアルツハイマー病病理の解明
見栄えの悪いブロットから、論文発表可能なデータへ
Simple Western Jessが神経変性研究をどのように前進させているかをご覧ください。
「Simple Westernの使用は、非常にやりがいがありました。特に、ウェスタンブロッティングアッセイをSimple Westernで完全に自動化されたフォーマットに移行することがいかに簡単であったか、また、CST抗体がプラットフォーム上でいかにうまく機能するかという点です。」
Chris LaBreck, Ph.D., Senior Product Scientist, Cell Signaling Technology (CST)
「時間の節約になります！ピペッティングや操作のミスから解放されます。サンプルをロードして結果を待つだけで、その間は他の活動に専念できます。」
Nicolas G. Bazan, M.D., Ph.D., Director, LSUHSC Neuroscience Center of Excellence
「私たちの顧客は、迅速な納期で高品質なデータを期待しています。Jessのおかげで化合物の効力を正確に評価でき、その高いスループットで複数の化合物を迅速かつ効率的にスクリーニングできます。」
Rachel Doidge Ph.D., Senior Research Scientist, Aurelia Bioscience
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