Leoシステム

Leoシステムは、ハイスループットな定量的ウェスタンブロット解析を実現します。

Simple Westernテクノロジーを搭載したLeoシステムは、ハイスループットで完全自動化されたキャピラリーウェスタンブロット解析プラットフォームです。Leo™は、再現性の高いタンパク質検出と、相対定量および絶対定量の両方を卓越した効率で提供します。自動化されたワークフローにより、1回のランで最大100本のキャピラリーを処理できるため、実験能力が向上し、わずか3時間で信頼性の高い定量結果が得られます。

Leo instrument image

Leoの仕組み

実績と信頼のあるSimple Westernテクノロジーをベースに開発されたLeoは、1回のランで最大96サンプルを処理でき、処理時間はわずか3時間です。これにより、実験スループットが大幅に向上し、分析グレードのタンパク質定量のための大規模な実験が可能になります。免疫測定法の定量能力と、ウエスタンブロット法のサイズ分解能および特異性を兼ね備えています。Leoは、1~4個のキャピラリーカートリッジを使用して、1回のランで25~100個のキャピラリーを処理できる柔軟性を備えています。各ウェルは最大4回まで再サンプリングでき、それぞれ別のキャピラリーで分析できるため、以前のサンプリングからのサンプルの持ち越しを心配する必要はありません。化学発光および蛍光マルチプレックス、RePlex、および再サンプリング機能により、Leoは1サンプルあたり最大24種類のタンパク質ターゲットを検出できます。創薬プロセス全体を通してニーズを満たすこの1台の装置に、安心して投資してください。

ハイライト

Leoバーチャルツアー
Leo Virtual Tour thumbnail

3D空間で再現されたバーチャル環境でLeoの機能をご体験ください

Dr. Alexandre Lucasをご紹介します

Dr. Lucas博士から直接話を聞き、Leoが研究者によるタンパク質分析の方法をどのように変えているのかをご覧ください。

Leoシステムでできること?

効率性と柔軟性で結果を加速

Leoは、わずか3時間で最大100本のキャピラリーを処理できる能力を備え、より少ない時間でより多くの作業をこなせるようサポートします。サンプルをセットしてスタートボタンを押すだけで、すぐに分析結果が届きます。手動操作は一切不要。プレートやメンブレンの洗浄も必要ありません。ピペット操作、測定、そして完了です。

Leoは、必要なサンプルだけを処理できる柔軟性も提供します。小規模な研究からハイスループット実験まで、1本、2本、3本、または4本すべてのキャピラリーカートリッジを選択できます。これにより、試薬を無駄にしたり、96サンプル分の蓄積を待ったりすることなく、スループットを拡張できます。各測定をワークフローに合わせて完全にコントロールできます。

図右:Leoは1回の測定で最大4つのカートリッジに対応し、各カートリッジは25本のキャピラリーを処理するため、1回の自動測定で最大100本のキャピラリーを処理できます。この構成により、1回の実験で最大4つの分子量ラダーと96種類のサンプルを分析できます。化学発光検出の場合、測定時間は最短3時間、蛍光検出(近赤外線および赤外線)の場合は約5時間で完了するため、1営業日で大量のサンプルを処理できます。

Simple Western Leo has 100 capillary capacity

高精度定量分析のための大規模実験

Leoは、1回の高精度測定で最大96サンプルの実験に対応でき、大規模な標準曲線、反復測定、キャリブレーター、QCサンプル、および試験サンプルに十分な余裕を提供します。

さらに、Leoの4つのカートリッジのうちいずれか1つに標準曲線を設定し、残りの3つを使用してサンプルを高精度に定量できます。最適化されたアッセイでは、生物分析法バリデーションで期待される標準的な80~120%の範囲内の回収率が得られます。

図右:このグラフは、カートリッジ補正を有効にした後、カートリッジ1の標準曲線上に、4つのカートリッジすべてからの参照サンプルのデータポイント(赤色で表示)を重ね合わせたものです。サンプルデータポイントは互いに非常によく一致しており、単一のカートリッジ上の標準曲線がLeoでの正確かつ精密な定量に使用できることが確認されました。

Simple Western Leo Cartridge Reproducibility Graph

機器間で一貫した結果を実現し、効率的なコラボレーションを促進

Leoは複数の機器間で非常に一貫した結果を提供し、使用する機器に関わらずデータの比較可能性と信頼性を確保します。これにより、異なる場所間での比較が容易になり、機器のばらつきが結果に影響を与えないことが保証されます。これは、大規模な共同研究、臨床試験、およびデータの一貫性が極めて重要なその他のアプリケーションにおいて特に重要です。

Simple Western Instrument Leo Inter-instrument precision

図(上):機器間の再現性により、施設間でのアッセイの適用可能性が裏付けられる。

少量のサンプル量で済むことと、再サンプリング機能があること

Leoはサンプルあたりわずか3µLの溶解液しか必要とせず、最大4回まで再サンプリングが可能です。各ウェルは最大4回まで再サンプリングでき、それぞれ別のキャピラリーで分析できるため、以前のサンプリングからのサンプルの持ち越しによる問題は一切発生しません。

Simple Western Leo Resampling capabilities

図(上):サンプルプレートには、0.3、0.2、0.1 mg/mLのHeLa細胞溶解液をそれぞれ8回ずつ、合計24サンプルずつ、1列にサンプルがロードされた。

低濃度ターゲットをピコグラムレベルの感度で検出

生物学的研究における多くの用途において、高い感度は不可欠であり、Leoはpg/mLレベルまでのタンパク質検出を可能にする。これは、低存在量のタンパク質バイオマーカーや治療介入の標的を測定する上で非常に重要となる可能性がある。

図右:Leoは、使用する検出チャネルに応じて、1ミリリットルあたり数百ピコグラムから数ナノグラムの低感度を示す。

Simple Western Leo Sensitivity Graph

3~4 logの広いダイナミックレンジにより、高シグナルおよび低シグナル標的の多重検出が可能に

バイオマーカー探索など、タンパク質濃度が大きく変動するアプリケーションにおいて、タンパク質を正確に定量するには、広いダイナミックレンジが不可欠です。Leoは3つの検出チャンネルで3~4 logの広いダイナミックレンジを提供し、1つのサンプルで複数のタンパク質を確実に定量できます。これにより、サンプル前処理の複雑さを軽減し、ハイスループットワークフローの効率を向上させます。

図右:RNaseAは、化学発光、近赤外線、赤外線の3つのLeo検出チャネルすべてで検出された。μg/mLから低pg/mLまでの濃度範囲を網羅する5倍希釈系列を作成した。同じロットの試薬、プレート、カートリッジを使用して、2台のLeo装置を並行して稼働させた。

Simple Western Leo Broad Dynamic Range Graph

RePlexを用いた総タンパク質による正規化

総タンパク質による正規化は、総タンパク質負荷量のばらつきを補正し、一般的なハウスキーピングタンパク質で起こりうる生物学的変動の影響を受けないため、信頼性の高いタンパク質定量に不可欠です。免疫測定データを総タンパク質で正規化することで、結果の正確性と信頼性が確保されます。Leoでは、化学発光免疫測定法と蛍光免疫測定法の両方で総タンパク質による正規化が可能であり、ターゲットの発現レベルに関わらず、より柔軟な対応が可能です。

図、右:単一の毛細管内で実施された免疫測定法と総タンパク質検出。未処理またはカリキュリンA処理したJurkat細胞溶解液中のAKTリン酸化。リン酸化AKTと全AKTは、それぞれ化学発光と近赤外蛍光を用いてプローブ1で検出され、総タンパク質シグナルはプローブ2で検出された。

Simple Western Leo Total Protein Normalization Data

強力なデータ分析機能

Simple Western v7向けCompassソフトウェアは、直感的なインターフェースと豊富なツール(標準曲線や注釈機能など)により、データ分析を効率化します。また、規制要件を満たすため、21 CFR Part 11に準拠しています。

Compass for Simple Western Version 7

仕様 

測定時間

ポン引き

or 

5時間 with RePlex or Fluorescent Detection 

最大サンプル数Up to 100 
1回のランあたりのサンプル数Up to 96 
最小サンプル容量3 µL 
サンプル冷却なし
検出化学発光と蛍光(近赤外線および赤外線)
RePlex Yes 
重量136 kg / 300 lbs 
機器サイズ (H x W x D)0.75 m x 0.70 m x 0.73 m / 2.5’ x 2.3’ x 2.4’ 
電源

US/CAN 120 V AC, 60 Hz, 5.0 amps 

China 220 V AC, 50 Hz, 2.7 amps 

Europe 230 V AC, 50 Hz, 2.6 amps 

Japan 100 V AC, 50/60 Hz, 6.0 amps 

動作温度18–23 °C 
動作時の相対湿度(結露なきこと)20–60 °C 

代表的なパフォーマンスデータ

 

 

化学発光免疫測定法化学発光法による総タンパク質蛍光免疫測定法
精度アッセイ内ピーク面積変動係数<15%1 <15%1 <15%1 
アッセイ間ピーク面積変動係数<15%2 N/A <15%2
アッセイ内定量変動係数<10%3 N/A <20% 
ラン間定量CV<10%3 N/A N/A 
機器間定量変動係数<10%3 N/A N/A 
感度検出限界Low pg ng High pg 
ダイナミックレンジ3-4 logs 2-3 logs 3-4 logs 
サイズ範囲分子量(MW)ラダーの範囲は2~440 kDaです。
CVのサイズ設定<10% 
分解能(±分子量差)

± 10% for MW >20KDa 

± 15-20% for MW <20KDa 

サンプルが必要です0.3-1.2 µg+ 0.3-1.2 µg+ 2-4 µg+ 

各実験において、分割サンプル、同一ロットの試薬、プレート、カートリッジを使用し、特性が十分に解明されたアッセイの代表的な性能データを示す。

1信号対雑音比が250を超えるモデルアッセイシステム(n=96)に基づき、Leoはカートリッジ補正を使用する。

2モデルアッセイシステムに基づくと、信号対雑音比は250以上、n=3であり、Leoはカートリッジ補正を使用しています。

3 LLOQ以上の全サンプルについて、標準曲線を用いて算出した濃度の変動係数(%CV)。Leoはカートリッジ補正を使用しています。

+ 毛細管1本あたりに必要なサンプル量:3µL/毛細管

製品リソース

ウェビナー

Leoの最新バーチャルイベントの録画をご覧ください。このイベントでは、Leoに搭載された新しい蛍光ベースの検出機能を紹介し、タンパク質分析におけるシステムの有用性を拡大します。

このウェビナーでは、Leo社の化学発光性能に関するデータを提供します。これには、スループット、感度、ダイナミックレンジ、アッセイの適用性、およびCGT、TPD、MOA研究などの主要な応用分野が含まれます。

このウェビナーでは、複数のアッセイモデルを用いたLeoの蛍光性能について、初めて詳しくご紹介します。主なデータ項目としては、精度、感度、ダイナミックレンジ、プラットフォーム間の互換性、および多重検出におけるワークフローの柔軟性などが挙げられます。

このウェビナーでは、Leoがウェスタンブロットを定量的な生物分析法へと変革する可能性を秘めていることを紹介します。この方法は、遺伝子治療の有効性から標的タンパク質分解研究まで、タンパク質発現の堅牢な定量的測定に採用するのに適しています。

Leo発表イベントを視聴する

Leoの発売イベントの録画をご覧いただき、創薬から分析開発、そして商業化に至るまで、Leoがどのようにお客様のニーズに応え、次のマイルストーン達成を加速させるかをご確認ください。

Leoのユーザーの声

Leoが細胞・遺伝子治療の専門家と出会った時、何が起こったのか?

#ASGCT2025でLeoを体験したお客様の声を直接お聞きください。このビデオでは、Leoの革新的な機能と比類のないスループットと精度によって、タンパク質分析がどのように変革されているのか、その印象や特徴をご紹介します。

引用文献