流式细胞术是一种基于激光检测的常用技术,用于对单细胞悬液中的细胞进行计数、分选和表型分析。Bio-Techne提供多种抗体及其他试剂与工具,助您高效简化流式细胞术实验流程。

精选流式细胞术产品

更灵活的流式细胞术方案设计

浏览丰富的mFluor™Violet偶联抗体产品目录,提高实验的通用性。

快速、温和且简单的单细胞分离

使用Pala细胞分选仪和单细胞分配仪会使单细胞分选更快速更简单。了解这款台式仪器如何结合微流控技术、流式细胞术和直接液体分配技术,一步完成温和的细胞分选与分配。

Fluorokines™:荧光标记蛋白

轻松检测CAR T或CAR NK细胞制剂的转导效率,或确定新冠病毒感染及接种疫苗后的B细胞特异性。

4 rows of fluorescently conjugated antibodies in vials with white and blue labels, and lids of various colors.

流式细胞术抗体

查找我们经流式细胞术验证的全系列抗体,包括荧光标记的一抗、二抗及同型对照。探索我们种类丰富的荧光偶联抗体,包括Alexa Fluor® 488、Alexa Fluor® 647、PE、PE-Cy7™等!选用我公司的多色流式细胞术试剂盒和方案,让流式细胞术方案设计不再需要反复试错。

流式细胞术实验设计工具

流式细胞术Panel Builder工具

使用Panel Builder工具快速查找兼容试剂,节省时间并减少高代价失误。

交互式细胞标志物工具

了解更多关于Bio‑Techne旗下品牌R&D Systems的细胞表面和细胞内标志物的信息。

Meet MitoBrilliant™ Dyes

新一代荧光染料,专为活细胞与固定细胞中线粒体的定位与标记而设计,且兼容流式细胞术。

MagCellect™细胞分选试剂盒和试剂

采用基于磁珠的阳性或阴性选择,无需使用专用层析柱即可分离和富集细胞群。

精选MagCellect试剂盒

B细胞CD4+ CD25+调节性T细胞CD44+细胞EpCAM+细胞
CD4+ T细胞CD8+ T细胞E-Cadherin+细胞NK细胞
CD14+单核细胞EGFR+细胞  

关键的流式细胞术资源

冠状病毒研究抗体

探索我们的冠状病毒研究抗体,包括精选的 SARS-CoV-2 检测与中和实验专用产品。

流式细胞术手册

探索简明易懂,适合新手及资深科研人员参考使用的流式细胞术指南。

细胞标志物工具

交互式资源工具,助您探索细胞表面和细胞内标志物。

流式细胞术培训网络研讨会

了解如何设计、运行和分析多参数流式细胞术实验。

背景信息、常见问题解答、资源与产品

关于流式细胞术

流式细胞术是一种高通量的单细胞分析技术,利用激光快速激发悬浮液中细胞上的荧光标记偶联抗体。它是一款功能强大的工具,能够测量单细胞的多个参数,同时快速采集数百万个细胞的信息。在采用流式细胞术检测的过程中,单细胞悬液通过单束或多束激光时会引起光散射。可根据光散射特性分选细胞群,采用前向散射光分析细胞大小,采用侧向散射光判定细胞颗粒度。采用流式细胞术能够获得关于细胞大小和体积的信息,评估分离出的细胞亚群纯度,表征异质细胞群体中不同类型的细胞,同时作为一种技术手段,检测细胞表面和细胞内蛋白的表达情况。

通常在流式细胞术实验中采用荧光标记抗体或碘化丙啶等荧光基团化合物检测目标蛋白。使用具有非重叠最大发射光谱的荧光团,可实现对荧光染色细胞的同步单细胞检测。采用同型对照抗体作为阴性对照,验证流式细胞术实验结果。在肿瘤生物学、免疫学、传染病监测、病毒学和分子生物学等多个研究领域中,都应用了流式细胞术。

常见问题

什么是FACS?

荧光激活细胞分选(FACS)是一种特殊类型的流式细胞术。它提供一种可将异质性的生物细胞混合物逐个分选至独立容器的方法。细胞分选基于每个细胞特定的光散射特性和荧光特征。

在流式细胞术实验中,最少需要多少细胞?

在特定实验中,所需的细胞数量取决于您的具体需求。如果检测的抗原表达较稳定,相较于表达较少的蛋白,所需的细胞数量会较少。此外,和单色染色相比,在多色流式细胞术实验需要的细胞数量较多。然而,我们建议在每个试管100 µl染色缓冲液加入1 × 106个细胞,作为起始量。

在流式细胞术中使用哪些对照?

流式细胞术的对照品有以下几类。

  1. 仪器对照:在使用仪器前,应检测仪器制造商提供的校准颗粒或荧光微球,以确保仪器运行正常。
  2. 补偿对照:在进行多色流式细胞术实验时,不同荧光染料发出的发射光谱可能会重叠,并扩散至多个通道。校正溢出的过程称为补偿。为保证补偿效果,针对在实验中使用的每一种荧光染料,都需准备单独的染色样本。可通过使用细胞、补偿微球或抗体捕获微球进行设置。
  3. 设门对照:在流式细胞术数据分析中,最为关键的环节之一即为正确设置门。FMO对照对于解读流式数据和设置门而言是必要的。由于采用FMO对照能够在多色实验中进行可靠的背景评估,因此可准确区分阴性细胞群与阳性细胞群。
  4. 细胞活性对照:死细胞可能因产生自发荧光,且更易发生抗体非特异性结合,所以会产生假阳性结果。因此,需要在数据分析过程中剔除这些死亡细胞。可以采用7-AAD、Calcein AM及碘化丙啶等多种荧光染料区分死细胞与活细胞。
  5. 未染色细胞对照:某些细胞组分(例如黄素辅酶和NADPH)是能够产生自发荧光的内源性荧光团。将未染色细胞样本上样至流式细胞仪进行检测,可以确定由自发荧光引起的背景荧光强度,从而能够进行合适的设门。
  6. 同型对照:采用同型对照评估抗体类别不同引起的非特异性结合。同型对照是一种对目标缺乏特异性的抗体,但在类别、类型和一抗荧光标记方面完全匹配。

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