再生医学
再生医学中的干细胞疗法利用干细胞具有自我更新和多向分化潜能的特性，通过减少炎症并调节免疫系统来修复体内受损伤的细胞，这使得干细胞疗法可用于多种疾病的治疗。目前，干细胞疗法已被用于自身免疫、炎症、神经、骨科类疾病和外伤的治疗。虽然干细胞疗法不一定能够完全治愈治愈这些疾病，但在许多情况下可以大幅延缓疾病的进一步恶化，提高患者的生活质量。Bio-Techne®可提供用于iPSC、MSC等多种干细胞疗法相关的解决方案。
扫描下方二维码，
获取再生医学相关技术手册及Bio-Techne®技术支持
一、iPSC细胞疗法
iPSC细胞疗法是利用iPSC的自我更新和多能性，分化获得健康的成体干细胞或其他细胞，回输患者体内，完成组织、器官再生，实现疾病治疗的目的。Bio-Techne®拥有丰富产品线，可提供GMP蛋白、 GMP小分子、培养基以及鉴定试剂/试剂盒，为iPSC细胞疗法提供创新、完善的解决方案，助力临床研究及商业化。相比其他干细胞，iPSC成本更低、更易获得、生产过程控制更严格，拥有广阔的应用前景。iPSC细胞疗法包括细胞重编程、iPSC培养鉴定及建库、iPSC分化、分化细胞产品鉴定等流程。
1、iPSC重编程
强制终末分化细胞表达特定的转录因子，可将其重编程为iPSC。相比于整合型重编程技术，非整合技术更具安全性，已成为发展趋势。常见的非整合技术包括仙台病毒、游离型载体、蛋白及小分子等。Bio-Techne®可提供多种方案将体细胞重编程为iPSC，以下方案仅供参考。
1）小分子重编程方案：
CHIR 99021、 SB 431542、 RepSox、 DBZ、 Thiazovivin、 3-Deazane-planocin A、 PD 0325901、 Trichostatin A、 CHIR 98014
2）成纤维细胞重编程方案（仙台病毒诱导）：
重组蛋白：FGF basic、B18R
小分子： CHIR 99021、 Y27632、 A83-01、 PD0325901
3）PBMC重编程方案（mRNA诱导）：
重组蛋白：IL-3、IL6、SCF、TPO、FIt-3L、G-CSF
小分子：CHIR 99021、Y27632、A83-01、PD0325901
2、iPSC培养与鉴定
1）iPSC培养
iPSC培养阶段需维持其多能状态，因此需要严格的培养体系。当前iPSC的培养体系包括滋养层依赖性培养体系和非饲养层培养体系，但对于临床应用，无饲养层培养体系是必要的。Bio-Techne®可提供无滋养层培养体系所需的细胞因子、小分子、培养基添加剂及基质胶/细胞外基质蛋白等原材料。
更多蛋白、小分子产品信息，请访问：https://www.rndsystems.com/cn。
Bio-Techne同时推出ExCellerate™ iPSC扩增培养基（CCM036），搭配基质蛋白使用，支持研究和临床阶段iPSC进行无滋养层培养。 GMP级ExCellerate™ iPSC扩增培养基（CCM036-GMP）改进了原来的无血清配方，更适合在研究和转化流程中对人iPSC进行无滋养层扩增，为ES和iPSC提供更加稳定且可重复的培养环境。本产品已向美国FDA备案DMF文件，再生医学和干细胞治疗研究企业向FDA申报IND时可以轻松获取相关信息。 |
优势：
- 完全培养基，无需补充生长因子
- RUO与GMP等级，基础研究到临床应用的无缝衔接
- 长期培养可维持遗传稳定性和分化潜能
- 性能稳定可靠，兼容多种基质和细胞系
2）iPSC鉴定
《人源干细胞产品药学研究与评价技术指导原则（试行）》指出，对于在多能干细胞阶段建库的情形，应进行全面的检定，包括但不限于鉴别、活性、标志物、细胞干性/多能性、三胚层方向的分化标志物检测等。
除上述试剂盒外，Bio-Techne还可提供多种干细胞标志物的荧光标记抗体，供您选择。
| 细胞干性标志物 | OCT4、SOX2、Nanog |
| 细胞多能性标志物 | TRA-1-81、TRA-1-60、SSEA4、SSEA3 |
| 三胚层分化标志物 | 外胚层：Otx2… 中胚层：Brachyury、BMP2… 内胚层：Sox17、GATA-4… |
更多抗体相关产品信息，请访问：https://www.rndsystems.com/cn。
3、iPSC分化
iPSC通过自我更新能够在未分化状态下几乎无限扩增，结合其全能性在特定培养条件下可分化为细胞状态基本一致的产品，有助于实现标准化现货细胞产品的制备。Bio-Techne提供的iPSC分化解决方案，包括NK细胞、神经系统细胞、巨噬细胞、胰岛细胞、MSC、心肌细胞等。
1）iPSC-NK细胞：
| 细胞因子 | IL-2、 IL-3、 IL-7、 IL-15、 FIt-3L、 SCF、 BMP-4、 FGF basic、 VEGF、 Activin A、 EPO… |
| 小分子 | Y27632、FICZ… |
2）iPSC-神经系统细胞：
| 细胞因子 | FGF basic、Noggin、Sonic Hedgehog、GDNF、BDNF、TGF-β3、FGF8… |
| 小分子 | SB 431542、DAPT、L-Ascorbic acid、Retinoic acid、Purmorphamine、DMH2、D-cAMP… |
3）iPSC-巨噬细胞：
| 细胞因子 | BMP-4、FGF basic、VEGF、SCF、IGF-I、IL-3、M-CSF、GM-CSF… |
| 小分子 | Y27632… |
4）iPSC-胰岛细胞：
| 细胞因子 | Activin A 、BMP-4、FGF basic、VEGF、Wnt-3a、Noggin、EGF、KGF、beta-Cellulin、FGF-10… |
| 小分子 | CHIR 99021、LDN 193189、T3、Nicotinamide、Retinoic acid、Heparin… |
5）iPSC-MSC：
| 细胞因子 | Activin A、BMP-4、FGF basic、PDGF-AA、PDGF-BB、TGF-β1、IGF-I、PDGF-AB… |
| 小分子 | CHIR 99021、Y27632、SB 203580… |
6）iPSC-心肌细胞：
| 细胞因子 | Activin A、BMP-4… |
| 小分子 | CHIR 99021、L-Ascorbic acid、endo-IWR-1… |
| 培养基添加剂 | N21-MAX minus Vitamin A … |
了解具体解决方案内容及其他iPSC分化方向解决方案，可联系：Marketing.CN@bio-techne.com。
4. 终末分化细胞产品鉴定
Bio-Techne®拥有抗体、ELISA、ELISpot、Luminex® Assay等众多产品，覆盖多种干细胞产品的鉴定及质量控制。
1）iPSC-CAR NK 细胞
| 细胞表型 | 标志物 | 抗体：CD3、CD56、CD16… |
| CAR阳性率 | 靶点 | 蛋白：BCMA、CD19、EGFR、Her2、GPC3、MLSN… |
| 细胞活化/抑制状态表征 | 激活受体 | 抗体：Nkp46、Nkp44、Nkp30、Nkp80、NKG2C、NTB-A 、NKG2D… |
| 抑制受体 | 抗体：KIR、KIR3DL1、NKG2A… | |
| 细胞耗竭 | 标志物 | 抗体：TIGHT、PD-1、TIM-3 |
| NK细胞杀伤 | 标志物 | 抗体：FasL、TRAIL… |
| 分泌细胞因子 | Quantikine® ELISA：GM-CSF、Granzyme B、IFN-γ、IL-10、TNF-α Luminex® Assay： Human XL Cytokine Luminex® Performance Panel Ella Simple Plex™： Ella Simple Plex™ Assay Panel Builder | |
| 功能分析 | Cell-Mediated Cytotoxicity Assay Kit LDH-Cytotoxicity Assay Kit | |
| 工艺残留 | 因子残留 | Quantikine® ELISA：IL-2、IL-3、IL-7、IL-15… |
| RCL/RCR | Quantikine® p24 ELISA | |
| 安全性 | 支原体 | MycoProbe Mycoplasma Detection Kit |
2）iPSC-神经系统细胞
| 神经干细胞 | 标志物 | 抗体：Nestin、Pax6、Noggin、Sox1、Sox2、MAP2… |
| 神经元细胞 | 标志物 | 抗体：Tuj1、Synaptophysin、α -Synuclein、NCAM1… |
| 工艺残留 | 因子残留 | Quantikine® ELISA：FGF basic、Sonic Hedgehog、GDNF、BDNF… |
| 安全性 | 支原体 | MycoProbe Mycoplasma Detection Kit |
其他iPSC分化细胞类型鉴定解决方案，可联系：Marketing.CN@bio-techne.com。
二、MSC细胞疗法
间充质干细胞（Mesenchymal stem cell，MSC）是中胚层来源的一类具有多向分化潜能的多能干细胞统称，具有损伤组织修复、抑制炎症、免疫调节等功能。常见来源为组织分离或iPSC培养分化。Bio-Techne®拥有MSC扩增冻存培养基、重组蛋白、抗体、ELISA等一系列产品，助力MSC细胞疗法的临床研究及商业化。
1、MSC的扩增培养
1）适用于MSC的扩增培养基
Bio-Techne适用于MSC的StemXVivo培养基是专为理想扩增而设计的，一致性好，提供无异源成分或无血清产品。
| 产品 | 描述 | 货号 |
| StemXVivo Mesenchymal Stem Cell Expansion Media | 适用于人、小鼠和大鼠MSC的培养基 | CCM004 |
| StemXVivo Xeno-Free Human MSC Expansion Media | 无人源或动物源成分 | CCM021 |
| StemXVivo Serum-Free Human MSC Expansion Media | 无血清的扩增培养基 | CCM014 |
2）适用于MSC扩增的蛋白与小分子
MSC体外扩增时，需要向培养基中添加生长因子与小分子来促进增殖、维持功能并提高回输到体内后的存活率。Bio-Techne提供多种科研级和再生医学所需的GMP级、Animal-Free级产品。
a）RUO产品
- 针对活性、纯度和内毒素含量的严格质控标准
- 高文献引用量
- 高批间一致性
- 完善的客户服务体系
| 蛋白 | 人 | 小鼠 | 重组蛋白 | 人 | 小鼠 |
| BMP-2 | 355-BEC | 355-BEC | IGF-1 | 291-G1 | 791-MG |
| BMP-4 | 314-BPE | 5020-BP | 6630-GR | ||
| BMP-6 | 507-BP | 6325-BM | IL-6 | 206-IL | 406-ML |
| EGF | 236-EG | 2028-EG | 7270-IL | ||
| FGF basic | BT-FGFB | 3139-FB | PDGF-BB | 220-BB | |
| FGF-4 | 7460-F4 | 7486-F4 | TGF- β1 | 7754-BH | 7666-MB |
| GDF-5/BMP-14 | 8340-G5 | 853-G5 | TGF- β2 | 302-B2 | 7346-B2 |
| HB-EGF | 259-HE | TGF- β3 | 8420-B3 | ||
| Wnt-5b | 7347-WN | 3006-WN | Wnt-10b | 7196-WN | 2110-WN |
b）GMP、Animal-Free级产品
- 完善的质检报告（CoA）及申报支持文件
- 根据ISO 9001、ISO 13485认证的质量管理体系生产和检验
- 无动物源成分
- 整个生产流程严格按照GMP标准操作
| 蛋白 | 来源 | GMP货号 | Animal-Free货号 |
| BMP-2 | CHO | 355-GMP | |
| BMP-4 | E.coli | 314E-GMP | AFL314E |
| EGF | E.coli | 236-GMP | AFL236 |
| FGF basic | E.coli | BT-FGFB-GMP | BT-FGFB-AFL |
| E.coli | BT-FGFB-GMP | BT-FGFB-AFL | |
| IGF-1 | E.coli | 291-GMP | AFL291 |
| IL-6 | E.coli | 206-GMP | AFL206 |
| PDGF-BB | E.coli | 220-GMP | AFL220 |
| TGF- β1 | CHO | 240-GMP |
| 小分子 | GMP货号 |
| CHIR 99021 | TB4423-GMP |
| Y-27632 | TB1254-GMP |
| SB 431542 | TB1614-GMP |
3）MSC的冻存与复苏
Bio-Techne适用于MSC的冻存液能够确保细胞复苏后的活力。
| 产品 | 描述 | 货号 |
| StemXVivo Serum-free MSC Freezing Media | 无血清型，适用于人/小鼠/ 大鼠MSC的冻存 | CCM016 |
| CryoDefend-Stem Cells Media | 适用于特定的MCS的冻存 | CCM018 |
CEPT Cocktail Kit由四种小分子构成，可在冻存、复苏过程中有效保护MSC，提高存活率。
| 试剂盒 | 成分 | 货号 |
| CEPT Cocktail Kit（货号：7991） | Chroman 1 | 7163 |
| Emricasan | 7310 | |
| Polyamine | 7739 | |
| Trans-ISRIB | 5284 |
2、MSC的鉴定
实验所用的MSC细胞是否具有多向分化能力至关重要，在实验开始前应对所用细胞进行验证，确保其状态理想。Bio-Techne提供一系列试剂盒，通过细胞标志物的表达验证MSC的多能性。
| 产品 | 货号 |
| Human Mesenchymal Stem Cell Functional Identification Kit | SC006 |
| Mouse Mesenchymal Stem Cell Functional Identification Kit | SC010 |
| Human Mesenchymal Stem Cell 4-Color Flow Kit | FMC002 |
| Human Mesenchymal Stem Cell Verification Flow Kit | FMC020 |
| Mouse Mesenchymal Stem Cell 4-Color Flow Kit | FMC003 |
3、MSC的分化
高效且一致地推动MSC定向分化对提高实验效率、降低成本来说至关重要。Bio-Techne提供StemXVivo系列基础培养基、添加剂，它们包含成分明确的优质重组蛋白，此外还有一系列小分子化合物，能够高效推动MSC定向分化，保证实验的一致性。
| 培养基与添加剂 | 产品 | 货号 |
| 培养基 | StemXVivo Osteogenic/Adipogenic Base Media | CCM007 |
| StemXVivo Chondrogenic Base Media | CCM005 | |
| 培养基添加剂 | StemXVivo Human Osteogenic Supplemen | CCM008 |
| StemXVivo Mouse/Rat Osteogenic Supplement | CCM009 | |
| StemXVivo Adipogenic Supplement | CCM011 | |
| StemXVivo Human/Mouse Chondrogenic Supplement | CCM006 | |
| EMT Inducing Media Supplements | CCM017 |
注：培养基添加剂CCM008/CCM009/CCM011需搭配培养基CCM007使用，CCM006需要搭配CCM005使用。
| 小分子化合物 | 用途 | 货号 |
| AICAR | 诱导骨髓来源的MSC分化为成骨细胞 | 2840 |
| 5-Azacytidine | 诱导MSC向心肌细胞分化 | 3842 |
| CW 008 | 促进人MSC向骨细胞分化 | 5495 |
| Dexamethasone | 诱导人MSC分化为脂肪细胞 | 1126 |
| GSA 10 | 诱导MSC分化为成骨细胞 | 4918 |
| IBMX | 诱导MSC分化为脂肪细胞 | 2845 |
| Indomethacin | 诱导MSC分化为脂肪细胞 | 1708 |
| Insulin (human) recombinant | 促进脂肪生成 | 3435 |
| Kartogenin | 有效诱导MSC向软骨细胞分化 | 4513 |
| KI-7 | A2B受体的正变构调节剂，诱导间充质干细胞向成骨细胞分化 | 6787 |
| Pioglitazone hydrochloride | 改善MSC向心肌细胞分化 | 4124 |
| Purmorphamine | 诱导MSC分化为成骨细胞 | 4551 |
| SP 600125 | 防止MSC分化为脂肪细胞 | 1496 |
| SK 216 | 纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）抑制剂 | 6187 |
| Zebularine | 诱导MSC向心肌细胞分化 | 2293 |
4、MSC相关研究与开发
1）免疫调节研究
MSC的免疫调节功能十分强大，它可以与先天性或适应性免疫细胞相互作用，通过细胞直接接触、可溶性因子、外泌体等发挥免疫调节和抗炎作用。
a）外泌体
与MSC本身相比，MSC的外泌体显示出更小的副作用，越来越多的临床研究开始评估MSC来源的外泌体在不同疾病中的治疗效果。如果要检测MSC来源外泌体的特性，需要同时检测至少三个阳性标志物（如CD9，CD63，CD81、TSG101）和至少一个阴性标志物（如Calnexin、Cytochrome C）。
| 靶标 | 单克隆抗体（人）货号 |
| CD9 | MAB1880 |
| CD63 | MAB50482 |
| CD81 | MAB4615 |
| TSG101 | MAB11438 |
| Calnexin | NB300-518 |
| Cytochrome C | MAB897 |
b）免疫抑制功能
使用γ或者γ联合α诱导表达吲哚胺双加氧酶（），随后于淋巴细胞共培养可抑制淋巴细胞的增殖与γ、α的分泌。
| 靶标 | ELISA（人）货号 | 抗体（人）货号 |
| IFN-γ | DIF50C | MAB285 |
| TNF-α | DTA00D | MAB610 |
| IDO | VAL153 | MAB6030 |
2）MSC终末分化细胞功能研究
Bio-Techne提供一系列产品对MSC终末分化细胞（如脂肪细胞、骨细胞、软骨细胞等）功能标志物进行分析，包括Proteome Profiler™抗体芯片、金标准ELISA试剂盒和抗体等。
a）Proteome Profiler™抗体芯片
快速：同时分析数十个细胞因子的表达水平
经济：包含4块膜，每个细胞因子重复点样
方便：无需使用特殊的设备
| 产品 | 货号 |
| Proteome Profiler Human Adipokine Array Kit | ARY024 |
| Proteome Profiler Mouse Adipokine Array Kit | ARY013 |
| Proteome Profiler Rat Adipokine Array Kit | ARY016 |
| Proteome Profiler XL Human Cytokine Array for Osteogenesis | ARY022B |
b）ELISA试剂盒
| 脂肪细胞 | |||
| 靶标 | 物种 | Quantikine | Valukine |
| Adiponectin/Acrp30 | 人 | DRP300 | |
| 小鼠 | MRP300 | ||
| 大鼠 | RRP300 | ||
| Leptin | 人 | DLP00 | |
| 小鼠 | MOB00B | VAL618 | |
| 大鼠 | MOB00B | ||
| 软骨细胞 | |||
| 靶标 | 物种 | Quantikine | Valukine |
| SPARC/Osteonectin | 人 | DSP00 | |
| 骨细胞 | |||
| 靶标 | 物种 | Quantikine | Valukine |
| Osteocalcin | 人 | DOST00 | |
| 小鼠 | MOST00 | ||
| 大鼠 | MOST00 | ||
| Pro-Collagen I α 1 | DPCA00 | ||
| SPARC/Osteonectin | DSP00 | ||
c）抗体
| 脂肪细胞 | ||
| 靶标 | 物种 | 货号 |
| FABP4 | 小鼠/大鼠 | AF1443 |
| 人 | AF3150 | |
| 骨细胞 | ||
| 靶标 | 物种 | 货号 |
| Osteocalcin | 小鼠 | AF808 |
| 人/大鼠 | MAB1419 | |
| 软骨细胞 | ||
| 靶标 | 物种 | 货号 |
| Aggrecan | 人 | AF1220 |
| Mouse Collagen II | 小鼠 | AF3615 |
三、临床研究生物分析
Bio-Techne®拥有抗体、ELISA、ELISpot、Luminex® Assay、RNAscope™以及Proteome Profiler™ Arrays等产品，便于用户进行细胞治疗产品回输后的疗效和安全性监测。
体内分布：RNAscope™产品可实现细胞产品的原位检测；提供丰富流式抗体和靶点蛋白产品，检测细胞数目的动态变化；
产品安全性：Quantikine® ELISA、Liminex® Assay及Ella Simple Plex™ Assay，评估细胞产品回输后细胞因子释放情况。
四、相关资料：
1、线上Webinar及讲座
登录bilibili网站，搜索“Bio-Techne”，更多iPSC研究及解决方案分享，等您发现。
