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类器官与 3D 细胞培养试剂

类器官与三维(3D)细胞培养已成为研究人类器官发育、疾病建模、药物疗效或毒性筛选以及探索个性化医疗的关键技术体系。分化和培养这些高级体外多细胞组织所需的试剂与实验方案因起始细胞类型、器官和物种而异,主要包括多种细胞外基质配方、类器官培养基及添加剂、蛋白质、小分子化合物和抗体等。

类器官与三维(3D)细胞培养已成为研究人类器官发育、疾病建模、药物疗效或毒性筛选以及探索个性化医疗的关键技术体系。分化和培养这些高级体外多细胞组织所需的试剂与实验方案因起始细胞类型、器官和物种而异,主要包括多种细胞外基质配方、类器官培养基及添加剂、蛋白质、小分子化合物和抗体等。

3D 类器官模型

点击类器官类型,查看常用试剂、推荐标志物及实验方案。

Cultrex 合成水凝胶

告别基底膜提取物,升级为成分完全明确的合成细胞外基质,在不影响培养效果的前提下,大幅提升培养体系的稳定性与一致性。

2009年首次发表了利用 胚胎干细胞(ESC)和诱导多能干细胞(iPSCs) 构建 3D 脑类器官的实验方案。 研究表明,多能干细胞可分化为包含特定皮层区域、神经祖细胞群及皮层分层结构的脑类器官。此后,脑类器官被用于揭示物种间大脑发育的进化差异、脑区间互连机制,以及正常与病变脑区的发育生理学特征。iPSC 来源的脑类器官在药物发现、神经退行性疾病建模及病毒性脑感染研究方面展现出巨大潜力。

脑类器官培养常用试剂

产品名称目录号
2-巯基乙醇多种规格
高级 DMEM/F-12 细胞培养基(Thermo Fisher)12634010
Cultrex 类器官收获液3700-100-01
Cultrex UltiMatrix 低生长因子基底膜提取物

Cultrex 2 型低生长因子基底膜提取物
BME001-05

3533-010-02
GlutaMAX™ (Thermo Fisher)35050061
胰岛素多种规格
N-2 MAX 添加剂AR009
N21-MAX 添加剂AR008
N21-MAX 无维生素 A 添加剂AR012
青霉素/链霉素多种规格
重组人碱性成纤维细胞生长因子

重组人热稳定碱性成纤维细胞生长因子
BT-FGFB

BT-FGFBHS
重组人 Noggin 蛋白6057-NG
Y-27632 二盐酸盐(Rho 激酶抑制剂)1254

脑类器官推荐标志物

β-III 微管蛋白(克隆 TuJ-1)神经元标志物
EMX1背侧皮层标志物
EOMES中间祖细胞标志物
FOXG1前脑标志物
Frizzled-9海马体标志物
MAP2神经元标志物
Neuropilin-2海马体标志物
Pax6神经诱导标志物/腹侧皮层标志物
Prox1海马体标志物
SOX1神经诱导
波形蛋白神经元标志物

已发表的知名实验方案

Bagley, J.A. et al. (2017) Nature Methods 14:743.
Bershteyn, M. et al. (2017) Cell Stem Cell 20:435.
Lancaster, M.A. and J.A. Knoblich (2014) Nat. Protocols 9:2329.
Pollen, A.A. et al. (2019) Cell 176:743.

肿瘤类器官的培养条件,应与其同源正常组织类器官的生长条件保持相近。部分肿瘤干细胞发生基因突变,使其能在缺乏 EGFFGF等正常生长因子的条件下继续增殖。根据肿瘤类器官类型的不同,可在常规类器官培养基基础上,去除一种或多种细胞因子进行培养。

胃组织中存在 Lgr5+ 成体干细胞,该类细胞可在体外分离、培养并分化为胃类器官。早期类器官模型阐明了胃发育的分子机制,包括调控胃底或胃窦上皮形成的各类信号通路。胃类器官培养体系是研究胃部生理稳态与病变机制的重要工具,同时也可作为复杂生命科学模型,广泛应用于药物研发与疾病建模研究。

胃类器官培养常用试剂

产品名称目录号
A 83-01(ALK5 抑制剂)2939
Advanced  DMEM/F-12 细胞培养基(Thermo Fisher)12634010
CHIR 99021(GSK-3 抑制剂)4423
Cultrex UltiMatrix 低生长因子基底膜提取物

Cultrex 2 型低生长因子基底膜提取物
BME001-05

3533-010-02
Cultrex 类器官收获液3700-100-01
胃泌素 I(人源)3006
GlutaMAX (Thermo Fisher)35050061
HEPES3173
人胰岛素溶液多种规格
人转铁蛋白多种规格
N-乙酰半胱氨酸7874
N-2 MAX 添加剂AR009
N21-MAX 添加剂AR008
烟酰胺4106
青霉素/链霉素多种规格
重组人 EGF236-EG
重组人 FGF-10345-FG
重组人 Noggin 蛋白6057-NG
重组人 R-Spondin 1

重组人 Wnt/R-Spondin 激动剂
4645-RS

BT-WRSP1-3
重组人 Wnt-3a 蛋白5036-WN
B 202190(p38 MAPK 抑制剂)1264
Y-27632 二盐酸盐(Rho 激酶抑制剂)1254

胃类器官推荐标志物

E-钙黏蛋白胃上皮
Lgr5/GPR49胃干细胞标志物
MUC5AC胃小凹黏液细胞
MUC6腺体黏液细胞
胃蛋白酶原 C主细胞
生长抑素肠内分泌细胞
TFF1胃细胞
TFF2胃细胞

已发表的知名实验方案

Li, X. et al. (2018) Nature Comm. 9:2983.
McCracken, K.W. et al. (2014) Nature 516:400.
McCracken, K.W. et al. (2017) Nature 541:182.
Munero J. et al. (2017) Cell Stem Cell 21:51.

体外心脏组织构建技术推动了药物发现与毒性检测领域的发展,同时为再生疗法中的心脏组织工程提供助力。目前已开发多种 3D 心脏组织构建方法,包括 iPSC 来源的心肌细胞球体,以及基于 iPSC 生物打印并定向分化为心肌细胞的心脏类器官技术。然而,仍需优化实验方案和培养试剂,以进一步提升心脏组织的成熟度与结构复杂性。

心脏类器官培养常用试剂

A 83-01(ALK5 抑制剂)2939
CHIR 99021(GSK-3 抑制剂)4423
Cultrex UltiMatrix 低生长因子基底膜提取物

Cultrex 2 型低生长因子基底膜提取物
BME001-05

3533-010-02
Cultrex 类器官收获液3700-100-01
GlutaMAX (Thermo Fisher)35050061
HEPES3173
IWP 23533
IWP 45214
N21-MAX 添加剂

N21-MAX 无胰岛素添加剂
AR008

AR010
烟酰胺4106
重组人激活素 A11348-AC
重组人 BMP-4314-BP
重组人碱性成纤维细胞生长因子

重组人热稳定碱性成纤维细胞生长因子
BT-FGFB

BT-FGFBHS
重组人 FLT3BT-FT3L
重组人 IGF-1291-G1
重组人 IL-3203-IL
重组人 IL-6206-IL
重组人 IL-1110836-IL
重组人 SCFBT-SCF
重组人 sFRP-2 6838-FR
重组人音猬因子/Shh1845-SH
重组人 VEGFBT-VEGF
RPMI-1640 培养基 多种规格
SB 4315421614
Thiazovivin3845
Wnt-C595148
XAV 9393748
Y-27632 二盐酸盐(Rho 激酶抑制剂)1254

心脏类器官推荐标志物

α-肌动蛋白心肌细胞胞内标志物
心肌肌钙蛋白心肌细胞胞内标志物
连接蛋白 43间隙连接蛋白标志物
Flk-1中胚层祖细胞表面标志物
GATA4心脏祖细胞内标志物
HCN4窦房结起搏细胞标志物 
MLC2a心房成熟度标志物
MLC2v心室成熟度标志物
MYH6心房心肌细胞标志物
MYH7心室心肌细胞标志物
NanogiPSC 标志物
NKX2.5心脏祖细胞内标志物
OCT3/4iPSC 标志物
PDGF R alpha中胚层祖细胞表面标志物
RYR2钙稳态调控蛋白、成熟心肌细胞标志物
SCN5a质膜上转运蛋白标志物
SERCA2a成熟心肌细胞标志物
SOX2iPSC 标志物
SSEA-4iPSC 标志物
TBX5心脏祖细胞内标志物

已发表的知名实验方案

Andersen, P. (2018) Nat. Comm. 9:3140.
Kupfer, M.E. et al. (2020) Circulation Research 127:207.
Mills, R.J. et al. (2017) PNAS 113:E8372.
Drakhlis, L. et al. (2021) Nat. Biotech. 39:737.

多能干细胞来源的内耳类器官极大推动了我们对内耳发育和生理机制的认知。内耳类器官已被证实能发育出包含毛细胞、支持细胞及类似突触结构的感觉上皮组织,能够实现听觉与平衡觉信号的转导。这些模型在转化研究方面具有巨大潜力,可用于揭示支持耳蜗和前庭感觉组织再生的分子与细胞机制。

内耳类器官培养常用试剂

产品名称目录号
A 83-01(ALK5 抑制剂)2939
高级 DMEM/F-12 细胞培养基(Thermo Fisher)12634010
CHIR 99021(GSK-3 抑制剂)4423
Cultrex 类器官收获液3700-100-01
Cultrex UltiMatrix 低生长因子基底膜提取物

Cultrex 2 型低生长因子基底膜提取物
BME001-05

3533-010-02
GlutaMAX (Thermo Fisher)35050061
N-2 MAX 添加剂AR009
N21-MAX 添加剂AR008
PD 0325901(MEK 抑制剂)4192
青霉素/链霉素多种规格
重组人 BMP-4314-BP
重组人碱性成纤维细胞生长因子

重组人热稳定碱性成纤维细胞生长因子
BT-FGFB

BT-FGFBHS
重组人白血病抑制因子(LIF)7734-LF
SB 4315421614

已发表的知名实验方案

Koehler, K.R. et al. (2017) Nat. Biotech. 35:583.
Koehler K.R. and E. Hashino (2014) Nat. Protocols. 9:1229.
Liu, X. et al. (2016) Nat. Comm. 7:11508.

小肠、大肠和结肠由多细胞上皮组成,具备绒毛、隐窝等特征性形态结构。肠道隐窝中含有 Lgr5+ 肠道成体干细胞,负责肠道上皮的持续更新。肠道隐窝是首个用于构建长期 3D 肠道培养模型的材料,该模型即为人肠道类器官(hIO)或上皮类器官。肠道类器官培养技术可用于研究肠道生理稳态与病变机制,包括肠道屏障功能、营养吸收和组织再生等方向。此外,人肠道类器官也可由 iPSC 培育而成。iPSC 来源的人肠道类器官已成为胃肠发育生物学、药物毒性评估和个性化医疗领域的前沿模型系统。

肠道类器官培养常用试剂

产品名称目录号
A 83-01(ALK5 抑制剂)2939
高级 DMEM/F-12 细胞培养基(Thermo Fisher)12634010
Cultrex UltiMatrix 低生长因子基底膜提取物

Cultrex 2 型低生长因子基底膜提取物
BME001-05

3533-005-02
Cultrex 类器官收获液3700-100-01
GlutaMAX (Thermo Fisher)35050061
HEPES3173
N-乙酰半胱氨酸7874
N21-MAX 添加剂AR008
烟酰胺4106
青霉素/链霉素多种规格
前列腺素 E22296
SB 202190(p38 MAPK 抑制剂)1264
重组人 EGF236-EG
重组人 R-Spondin 1

重组人 Wnt/R-Spondin 激动剂
4645-RS

BT-WRSP1-3
重组人 Noggin 蛋白6057-NG
重组人 Wnt-3a 蛋白5036-WN
Y-27632 二盐酸盐(Rho 激酶抑制剂)1254

小肠上皮类器官推荐标志物

碱性磷酸酶肠上皮细胞
ASCL2/Mash隐窝细胞标志物
嗜铬粒蛋白 A肠内分泌细胞
E-钙黏蛋白肠道上皮
Lgr5/GPR49肠道干细胞标志物
溶菌酶潘氏细胞
MUC2杯状细胞
突触素肠内分泌细胞
绒毛蛋白肠上皮细胞

结肠上皮类器官推荐标志物

ASCL2/Mash隐窝细胞标志物
嗜铬粒蛋白 A肠内分泌细胞
E-钙黏蛋白肠道上皮
EpCAM/TROP-1上皮细胞标志物
EphB2结肠隐窝细胞标志物
Ki-67/MKI67细胞增殖标志物
Lgr5/GPR49肠道干细胞标志物

已发表的知名实验方案

Co, J.Y. et al. (2019) Cell Reports 26:2509.
Mahe M. et al. (2013) Curr. Protoc. Mouse Biol. 3:217
Sato T. et al. (2011) Gastroenterology. 141:1762
Sato T. and H. Clevers (2015) Cell. 161:1700
Sato T. and H. Clevers (2009) Nature. 459:262

利用多能干细胞构建的肾脏类器官培养体系可复刻肾脏复杂的组织结构特征,并表达足细胞、近端小管、远端小管等特异性细胞标志物。肾脏类器官培养技术的成熟有力推动了肾脏发育、生理机能及肾病(如慢性肾病)潜在机制的相关研究。此外,肾脏类器官在肾脏组织再生的转化医学研究中也具备广阔应用前景。

肾脏类器官培养常用试剂

产品名称目录号
高级 DMEM/F-12 细胞培养基(Thermo Fisher)12634010
CHIR 99021(GSK-3 抑制剂)4423
Cultrex 类器官收获液3700-100-01
Cultrex UltiMatrix 低生长因子基底膜提取物

Cultrex 2 型低生长因子基底膜提取物
BME001-05

3533-010-02
GlutaMAX (Thermo Fisher)35050061
全铁转运蛋白2914-HT
N-乙酰半胱氨酸7874
N-2 MAX 添加剂AR009
N21-MAX 添加剂AR008
青霉素/链霉素多种规格
重组人激活素 A11348-AC
重组人 BMP-2355-BM
重组人 BMP-4314-BP
重组人碱性成纤维细胞生长因子

重组人热稳定碱性成纤维细胞生长因子
BT-FGFB

BT-FGFBHS
重组人 FGF-9273-F9
维甲酸695
Y-27632 二盐酸盐(Rho 激酶抑制剂)1254

肾脏类器官推荐标志物

短尾蛋白中胚层标志物
细胞角蛋白 8输尿管芽标志物
GATA-3输尿管芽标志物
GFR α-1/GDNFR α-1输尿管芽标志物
HOXB7输尿管芽标志物
LHX-1/LIM1中胚层标志物
Pax2输尿管芽标志物
Pax8输尿管芽标志物
Ret输尿管芽标志物

已发表的知名实验方案

Little, M.H. and A.N. Combes (2019) Genes Dev. 33:1319.
Morizane, R. and J.V. Bonventre (2017) Trends Mol. Med. 23:246.
Nishinakamura, R. (2019) Nat. Rev. Nephrol. 15:613.
Rookmaaker, M.B. et al. (2015) Nat. Rev. Nephrol. 11:546.
Schutgens, F. et al. (2019) Nat. Biotechnol. 37:303.
Schutgens, F. et al. (2016) Eur. J. Pharmacol. 790:12.

肝脏是药物代谢和解毒的主要器官系统。正因如此,肝脏极易受到药物和各类化学毒物的损害。用于肝脏代谢研究的动物模型和传统体外检测体系往往难以精准复刻药物在人体内的真实毒性反应。 源自原代组织或诱导多能干细胞的肝脏类器官,已成为结构更完善、预测性更强的研究模型,广泛应用于肝毒性评估和药物筛选。 肝脏是药物代谢和解毒的主要器官系统。正因如此,肝脏极易受到药物和各类化学毒物的损害。用于肝脏代谢研究的动物模型和传统体外检测体系往往难以精准复刻药物在人体内的真实毒性反应。源自原代组织或诱导多能干细胞的肝脏类器官,已成为结构更完善、预测性更强的研究模型,广泛应用于肝毒性评估和药物筛选

肺部 3D 细胞培养模型已广泛应应用于肺组织再生研究、疾病建模(如囊性纤维化)以及病毒性肺部感染机制探索(如SARS-CoV-2) 。早期肺类器官由原代组织分离的 Lgr5+ 干细胞构建而成,如今 iPSC 来源肺类器官培养方案日趋成熟,大幅提升了该模型系统的灵活性与实用性,为个性化医疗和药物研发提供有力研究工具。

肺类器官培养常用试剂

产品名称目录号
A 83-01(ALK5 抑制剂)2939
高级 DMEM/F-12 细胞培养基(Thermo Fisher)12634010
Cultrex 类器官收获液3700-100-01
Cultrex UltiMatrix 低生长因子基底膜提取物

Cultrex 2 型低生长因子基底膜提取物
BME001-05

3533-010-02
GlutaMAX (Thermo Fisher)35050061
HEPES3173
N-乙酰半胱氨酸7874
N21-MAX 添加剂AR008
烟酰胺4106
青霉素/链霉素 多种规格
SB 202190 (p38 MAPK 抑制剂)1264
重组人 KGF/FGF-7BT-KGF
重组人 FGF-10345-FG
重组人 Noggin 蛋白6057-NG
重组人 R-Spondin 14645-RS
Y-27632 二盐酸盐(Rho 激酶抑制剂)1254

肺类器官推荐标志物

ACTTUB纤毛细胞标志物
α-平滑肌肌动蛋白平滑肌细胞标志物
FoxJ1纤毛细胞标志物
HOPX气道 1 型上皮细胞标志物
ID2肺祖细胞标志物
Lgr5/GPR49肺干细胞标志物
NKX2.1肺谱系标志物
p63气道基底细胞标志物
SFTPC气道 2 型上皮细胞标志物
子宫球蛋白/SCGB1A1棒状细胞标志物

已发表的知名实验方案

Dye, B.R. et al. (2015) eLife 4:e05098.
Miller, A. J. et al. (2019) Nature Protocols 14:518.
Sachs, N. et al. (2019) EMBO J. 34:e100300.

利用原代上皮组织构建乳腺类器官的实验方案,有助于阐明乳腺发育过程中的细胞命运决定和分子机制,包括导管形成和泌乳腺泡的转化。更为重要的是,这些 3D 培养技术可实现乳腺类器官的体外构建,现已应用于乳腺癌外药物发现及个性化药物筛选。

已发表的知名实验方案

Jamieson, P. et al. (2017) Stem Cells and Regeneration 144:1065.
Rosenbluth, J.M. (2020) Nat. Comm. 11:1711.
Sachs, N. et al. (2018) Cell 172:373.

胰腺类器官已成为研究胰腺癌、胰腺外分泌疾病及胰腺导管上皮基础发育机制的重要体外模型,并有望应用于糖尿病的再生修复与治疗研究。目前,小鼠原代胰腺导管组织构建胰腺类器官的成熟方案已较为完善,但从人源胰腺组织类器官的长期培养体系仍在不断优化完善。

胰腺类器官培养常用试剂

产品名称目录号
A 83-01(ALK5 抑制剂)2939
高级 DMEM/F-12 细胞培养基(Thermo Fisher)12634010
Cultrex 类器官收获液3700-100-01
Cultrex UltiMatrix 低生长因子基底膜提取物

Cultrex 2 型低生长因子基底膜提取物
BME001-05

3533-010-02
胃泌素 I(人源)3006
GlutaMAX (Thermo Fisher)35050061
N-乙酰半胱氨酸7874
N-2 MAX 添加剂AR009
N21-MAX 添加剂AR008
烟酰胺4106
青霉素/链霉素多种规格
重组人 EGF236-EG
重组人 FGF-10345-FG
重组人 Noggin 蛋白6057-NG
重组人 R-Spondin 1

重组人 Wnt/R-Spondin 激动剂
4645-RS

BT-WRSP1-3
重组人 Wnt-3a 蛋白5036-WN

胰腺类器官推荐标志物

HNF-6胰腺祖细胞
胰岛素 C 肽β 细胞
NeuroD1β 细胞
神经元素 3胰腺祖细胞
NKX6.1内分泌细胞
PDX-1胰腺祖细胞
SOX9胰腺祖细胞

已发表的知名实验方案

Broutier, L. et al. (2016) Nat. Protocols 11:1724.
Dossena, M. et al. (2020) Stem Cell Research & Therapy 11:94.
Georgakopoulos, N. et al. (2020) BMC Developmental Biology 20:4.
Greggio, C. et al. (2013) Development 140:4452.

前列腺类器官技术的快速发展,显著提升了我们研究前列腺癌、探索其潜在机制以及开发新型治疗策略的能力。前列腺类器官可由分离组织、成体干细胞或多能干细胞构建,为球状结构,具有分化假复层上皮细胞层,并能表达功能性雄激素受体。患者来源类器官,如异种移植(PDX)前列腺类器官,为药物发现和潜在疗法的毒理学筛选提供了实用模型。了解更多前列腺癌筛查相关工具。

前列腺类器官培养常用试剂

产品名称目录号
A 83-01(ALK5 抑制剂)2939
Cultrex 类器官收获液3700-100-01
Cultrex UltiMatrix 低生长因子基底膜提取物

Cultrex 2 型低生长因子基底膜提取物
BME001-05

3533-010-02
GlutaMAX (Thermo Fisher)35050061
N-乙酰半胱氨酸7874
N-2 MAX 添加剂AR009
N21-MAX 添加剂AR008
烟酰胺4106
青霉素/链霉素多种规格
前列腺素 E22296
重组人激活素 A11348-AC
重组人 EGF236-EG
重组人碱性成纤维细胞生长因子

重组人热稳定碱性成纤维细胞生长因子
BT-FGFB

BT-FGFBHS
重组人 FGF-10345-FG
重组人 Noggin 蛋白6057-NG
重组人 R-Spondin 1 4645-RS
重组人 Wnt-10b7196-WN
SB 202190(p38 MAPK 抑制剂)1264
睾酮多种规格

前列腺类器官推荐标志物

雄激素受体/NR3C4前列腺细胞
细胞角蛋白 5前列基底腺细胞
细胞角蛋白 8前列腺管腔细胞
细胞角蛋白 18前列腺细胞
整合素α 6/CD49f上皮干细胞
层粘连蛋白γ 1基质细胞
NKX3.1前列腺特异性转录因子
p63前列基底腺细胞
TMPRSS2前列腺细胞
TROP-2上皮干细胞
波形蛋白基质细胞

已发表的知名实验方案

Gleave, G.S. 等人(2020) The Prostate. 80:518.
Karthaus W.R. 等人(2014) Cell. 159:163

性能定制化蛋白

AI 修饰蛋白专为攻克细胞培养难题而设计,为细胞治疗与研究应用提供前沿解决方案。

AI modified proteins graphic

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